【求助】RT-PCR熔解曲线怎么分析?求帮助
有以下几个问题:
1.我们用的软件分别是stepone。图如下,熔解曲线怎么分析?Tm=88.73,这个Tm与引物的Tm有什么区别?还有这个溶解曲线的意义是什么?
2.右边标本栏里,出现的黄色三角形1,2是什么意思?
3.看网上说,退货温度要比引物Tm值低4-5度,但我们跑根据takara的RT-pcr说明书设置的退货延伸温度统一为60度,而有的引物Tm值才50度左右
4.2的-ΔΔCT法,对照组一定要等于1吗?如果做出结果对照组的离散程度比较大,2的-δδCT远大于1怎么办?结果还能用吗?
