【求助】pET-28a(+)原核表达不出目的蛋白
这个帖子发布于 11 年零 215 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
大家好！我最近在做蛋白的原核表达，诱导表达的是跨膜蛋白，大小是57.4KDa，用的是pET-28a(+)载体，宿主菌是BL21(DE3)。之前用不同的诱导条件为37℃、28℃，及不同的IPTG量（IPTG终浓度为25μmol、50μmol、100μmol、500μmol、1000μmol），均未诱导出目的蛋白。后来，我尝试将LB培养基更换成TB培养基，SDS电泳检测时，仍没有诱导出目的蛋白。现在我也不知道是什么原因？是跨膜蛋白的表达不能用原核表达吗？还是什么原因？请大家帮个忙？感激不尽！！！
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