请教:哪里错了(酵母单杂交)?为什么没人回答?很难吗?
已有研究表明,在筛选与酵母进化关系较近的单细胞生物的转录因子的过程中,常出现内源性的酵母表达激活物与DNA结合位点结合,并激活报告基因的表达,从而导致“假激活现象”。不过,酵母和哺乳动物的进化关系很远,在理论上出现这种问题的可能性较小。如果在试验中出现了这种可能性较小的假激活问题(即酵母内源性蛋白与被“捕获”蛋白存在一定程度的同源现象),可以用降低“DNA-蛋白质”结合力的措施,即用含有更多的已突变的片段构建一个随机剪切的DNA片段库的措施来进行补救。由于“诱饵”基因与被“捕获”蛋白的结合力高于与同源性蛋白的结合力,因而这种措施可以保证“诱饵”基因与被“捕获”蛋白结合,而不与同源性蛋白结合,从而避免“假激活现象”。
最后编辑于 2005-02-06 · 浏览 3399