【求助】56bp长核苷酸的稀释
发布于 2005-01-09 · 浏览 3448 · IP 贵州贵州
这个帖子发布于 20 年零 149 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
最近做一个56bp长的片段的连接，做了一次，但未连上，想找一下原因。还请各位帮忙：我的56bp 长的片段是由公司合成并且退火精制的。退火后两端各有一个ECORI和HINDIII，可以直接连接到经ECORI和HINDIII双酶切的PCDNA3.1上，我的酶切是没有问题，全是新酶，也单独切过，都切开了。连接时做了对照，单独的PCDNA3.1转化效果好，单酶切连接后转化也有很多菌。但我现在唯一没有把握的就是外源片段的量和PCDNA3.1的比例问题：我的外源片段为4nmol，然后溶解在40微升的水中。然后分别取4和1微升与1微升的PCDNA3.1连接。但连接未得到一个菌落。真不知是什么原因，是否我的外源片段的量太少了。谢谢
欢迎光临动物医学/动物科学专业
yinhp01正在申请动物医学/动物科学专业斑竹,请支持，谢谢
最后编辑于 2005-01-09 · 浏览 3448
9 10 点赞
