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【专题】G蛋白偶联受体相关实验汇总

发布于 2012-10-25 · 浏览 7268 · IP 浙江浙江
这个帖子发布于 12 年零 215 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
您幸福吗?您可知我们感知幸福其实依赖于G蛋白偶联受体(G Protein-Coupled Receptors, GPCRs)。它微小得看不见摸不着,但却与我们的生活息息相关,人类拥有至少907个G蛋白偶联受体,因而它也是科研的热点。

如果您也从事G蛋白偶联受体研究,建议来看看。丁香通实验方法频道特别整理出“G蛋白偶联受体”实验方法汇总,供您参考。发表实验点评,补充相关实验,还有机会赢取丁当。我们将从所有参加者中抽取5位幸运网友,每人奖励10个丁当。

具体参与方式:
1、点评已有实验(如图),比如PCR扩增和扩增产物克隆

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2、跟帖补充实验
比如:我认为G蛋白偶联载体还少药物应用相关的实验。

以下是G蛋白偶联受体相关实验技术:
1、【G蛋白偶联受体的发现】

2007年,罗伯特·莱夫科维茨和科比尔卡首次用T4溶菌酶融合法解析了β-肾上腺素受体(某种G蛋白偶联受体)的结构,该方法后来成为获取G蛋白偶联受体三维结构的常规手段,两位科学家因此荣获2012年诺贝尔化学奖。进行该项研究需要掌握的实验方法包括:

cDNA文库构建
重组DNA转化实验
PCR扩增和扩增产物克隆
大肠杆菌感受态细胞的制备与转化
蛋白质的表达、分离和纯化

2、【G蛋白偶联受体的检测】
GPCR属于膜蛋白--穿插细胞膜多达7次,而且构象形态多,因此其结构生物学分析不易开展。近年来,X线晶体成像技术、油脂立方相、核磁共振波谱等技术的发展让GPCR结构解析成为可能,具体的实验方法包括。

油脂介孔膜蛋白结晶
X射线晶体成像技术测定蛋白质结构
Western Blot免疫印迹实验操作规程

3、【G蛋白偶联受体的应用】
GPCR家族的建立推动了人类对细胞信号转导途径的认识。很多人类疾病与G蛋白偶联受体相关,因此它是制药行业重点研究的对象。相关的研究有:

G蛋白偶联受体活化激活PI3K信号通路
G蛋白偶联受体途径:GC-cGMP-PKG

丁香园 丁香通
2012.10.25


































最后编辑于 2012-10-25 · 浏览 7268

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