【求助】请教关于考马斯亮蓝测蛋白浓度的问题,请高手赐教
先说明一下,我刚进实验室,还是个彻底的菜鸟,前几天学习用考马斯亮蓝测纯化后尿蛋白的浓度,有一种蛋白分别测了原液和稀释20倍之后的浓度,但是测定结果很出乎意料,稀释20倍的换算成原液浓度是直接测得原液蛋白浓度的3-5倍,原液浓度是600多mg/L,而稀释20倍的液体再换算回来浓度是2000多mg/L,我上网查了考马斯亮蓝的测量范围,有人说1ug/mL到1000ug/mL之间的蛋白浓度与OD值都成线性关系,这让我很疑惑,到底是什么原因?忘高手赐教!(我是每个微孔加300微考马斯亮蓝和30微样本,每种样本加三个微孔,不知是不是我使用加样*技术不行,导致误差非常大?)
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 1990