【经验】SD大鼠立体定位成功后的心得体会（申请版主给加个分，要不有的帖子我看不了呀）

沐灵小韧

发布于 2011-09-03 · 浏览 6448 · IP 湖南湖南

最近在做脑出血模型，涉及到大鼠的立体定位，操作前虽然已从师兄那里学习了注意要点，但还是到园子里来逛了逛，想多看点，准备充分。但是发现园子里这方面的内容，特别是详细系统的操作流程基本没有，并且多半是好几年前的。在实验室里一位老实验技术员的详细指导下操作成功后，特地来总结一下，以给大家提供方便。（需要说明下，我要定的位置是苍白球，大家定的位置可能都不同，但基本固定方法应该差不多）

1.首先是麻醉问题，个人觉得只要剂量把握准确，注射部位恰当，老鼠是不会因为麻醉而死的。我用的是10%的水合氯醛，400mg/kg，麻醉前每一只大鼠都要称体重。曾经看到有人说要把水合氯醛稀释到7%或5%，我们实验室的经验是大鼠用10%，小鼠才稀释到5%，一直这么用下来，没什么问题。腹腔注射时一定要将老鼠头朝下，这样可以让肠子滑动，空出来一定的腔隙，45度进针后，一定要抽一下，防止针头进入膀胱或是其他脏器。麻醉成功的话几分钟老鼠即昏迷，可掐尾巴末端测试痛觉有无丧失，在老鼠尚有痛觉的情况下手术是很残忍的呀。

2. 我用的定位仪已经看不到型号了，据说是美国的，当时买了七八万，有些年头了，不过还算保护得比较好。常规的标准固定方法是耳杆刺破耳膜，但是我们实验室一直采用的不是这种方法，据说是之前的一位老师从一个挺牛的实验室学来的：在大鼠耳朵前方，两侧都有一个卵圆形的凹陷，大概有黄豆大，初学者可以不戴手套，仔细摸摸体会下，用手掐住凹陷的地方，老鼠眼睛会凸起来就说明摸对了。一侧的耳杆应该是先固定的，先将固定的这侧耳杆顶住大鼠脑袋一侧的凹陷处，再用尚未固定的那侧耳杆顶住另一侧，调整好，固定耳杆，尽量调整到两侧耳杆的刻度都在相同的位置上，这样以后一侧的耳杆是固定的，就不用每只老鼠都要调两侧耳杆了，因为老鼠的脑袋都差不多大嘛。这个凹陷的地方都是骨头，顶紧了之后老鼠的脑袋会固定得很好，左右不能动，只能以耳杆为轴转动。
3.用止血钳将大鼠嘴巴撑开，将舌头拨到一边，防止手术过程中呼吸道堵塞，并将上门牙挂到固定门齿的那个套上（对不住，我不知道专业名称），轻轻拽一下，不能用劲太大，要不就拽着颈椎了。拧紧螺丝后再将压鼻子的那个杆也向下压住，同样不能太紧，要保证老鼠的呼吸。这样一压之后老鼠的头顶就呈一个平面了，用手摁一摁，没有移动说明就固定好了。
4.用水将头顶的毛润湿，弯剪剪毛，碘伏棉签消毒皮肤表面，用左手往左右两侧撑开皮肤，右手持手术刀纵向切开约1.2cm切口（这个只适合我的实验，长度不拘泥，看适合自己要定的位置吧），用棉签使劲将肌肉骨膜什么的擦开（这个是为了使颅骨表面干燥，用刀开骨窗时刀不会滑，也有利于用笔做标记），后面的步骤在我的实验步骤里是需要开骨窗的，大鼠的颅骨比较硬，需要用尖刀片，手持手术刀柄下端，手腕用力，一刀一刀地划开颅骨，不要心急，特别是快要划开的时候，否则很容易误伤下面的脑组织。小鼠的话，在定位准确的前提下，用20ml注射器的针头可刺开一个洞，因为小鼠的颅骨比较薄。
5.定位，我的实验是以前囟为原点，前囟很好找，一划开皮肤就能看见，用小镊子前端向下压前囟部位，会看见周围的颅骨微微下陷。其他的定位方法因为没做过就不太清楚，文献里应该都能查到。
6.着重说下术后，手术结束后要将老鼠轻轻托起放到单独的笼子里，这样可以防止被其他的老鼠压住身体或撕咬，如果是冬天要用专用的保温垫，或者放在有暖气的房里。我这两天在空调房里做实验，自己都觉得空调冷气有点凉，所以就把窗帘拉开，老鼠放太阳底下晒着。我们老师说老鼠也是生命，做完手术跟人一样需要呵护的，否则老鼠会在心里说了：“你对我不好，我立马死给你看！”

要侧躺，注意不要让垫料什么的堵住鼻孔。我做的老鼠一般会在术后2小时左右醒来（手术过程半小时左右），刚醒来精神都不好的，最好等第二天恢复得差不多了再把几只老鼠放到一个笼子里，反正尽量减少所有导致术后死亡的可能性因素吧。

差不多就这么多了，还有什么问题，大家可以再提问，相互交流，我的经验也只是经验，不是标准答案，实验都需要自己摸索最适合自己的，当然，要以科学准则为前提。说实在的，要不是学医，从小就胆子小得要命的我打死也不会去摸老鼠呀，但是在科研里，无数老鼠贡献了它们的生命，再加上科里老师的身先示范，我对老鼠也越来越有感情了。科里的一位老教授信佛教，心慈面善，生活态度也很是豁达，听说他以前做实验时每次杀老鼠后都要给给老鼠烧香念经，这种修为我肯定达不到，不过这种精神是肯定要学习的。