【求助】elisa阴性值很高怎么办
筛选抗原抗体稀释度,自己用原核表达的蛋白包被板,包被液为ph7.4的碳酸盐溶液,包被过夜,PBST洗涤5min3次,用5%脱脂奶粉封闭37度2h,PBST洗涤5min3次,用PBST稀释一抗和二抗,一抗二抗都是37度作用1h,TMB显色13min加入终止液,读数。结果为阳性血清OD值都大于1,而阴性结果OD值也都在0.3以上,每次都这样,换了封闭液,也没什么效果。不知道该怎么办了?请各位有经验的朋友指点一下,非常感谢!!!!
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