【讨论】LAM 16KD 38KD
免疫学检验:
主要是检查结核菌素,蛋白衍生物实验(PPD),缺点是:无法区分结核杆菌和分枝杆菌,检出率约为:30%~50%,假阳性率约为:20%~30%,其特异性不够好,如:接种过卡介苗的患者对检验结果就有影响。
PCR(聚合酶链反应):
实验操作过程复杂而且麻烦,处理样本也比较繁杂,整个扩增过程对实验室的要求很高,而且操作过程中危险性高,整个过程还有扩增产物和芯片探针进行杂交、显色、洗板、上机判读等,全过程大约需要6小时才可以完成。
TB芯片:
结核芯片检测技术放置以下三项指标:
LAM、16KD、38KD,下面对放置此三项指标的原因作以简要说明:
LAM:
LAM是分枝杆菌属细胞壁的重要组成部分,属特异性抗原,具有较强的免疫原性,其检测的灵敏度较高,但除结核分枝杆菌外,其它分枝杆菌也有LAM成分,因此其特异性相对较低。结核分枝杆菌38 kD抗原与16 kD抗原是结核分枝杆菌所特有的抗原,它与其它分枝杆菌和非结核分支杆菌不存在交叉反应,其诊断的特异性较高【1】
LAM是一种非蛋白结合分枝杆菌抗原,主要存在于结核菌表面、具有较强的抗原性,能够刺激结核菌感染者产生抗体,LAM在其它分枝杆菌的表面含量很低,不能刺激机体产生高水平的抗体量,所以抗-LAM的特异性和敏感性均比较高。目前国际上已经采用LAM(lipoarabinomannan)检测结核IgG抗体,在2002年05月,美国HealthTech杂志,发表了一篇文章,介绍了Mossman Associates生物技术公司,利用他们所研究出来的一种脂阿拉伯甘露糖(lipoarabinomannan,LAM),来检测结核病人的IgG抗体,特异性可高达95%,灵敏度也高达70%,已经正式取得美国食品药物管理局(FDA)及日本厚生省(卫生部)的许可,做为对结核病人的检验和诊断的正式工具。
,把LAM与16Kda和38Kda的蛋白共同放在快速检测生物芯片上,也有另人满意的结果。在1500份的血清试验中,阳性总检出率为79.82%,特异性为81%,灵敏度为80%。现在正在进行大规模临床试验中。
16KD、38KD:
16KD、38KD均为结核分枝杆菌蛋白,之所以称之为16KD和38KD是由于蛋白的分子量不同,放置这两种蛋白的原因是由于:16KD和38KD均是结核分枝杆菌的一种特异蛋白抗原,尤其是38KD它是结核分枝杆菌特有,别的分枝杆菌所不具有或者含量非常低,在人感染结核分枝杆菌后,会产生对此38KD蛋白质的特异性抗体。16KD的加入,主要是大大的提高了实验的敏感度,而且不会影响实验的特异性。在人体接种了卡介苗后,会产生相应的抗体,其中也有38KD的蛋白,但浓度量非常低,结核杆菌感染造成的38KD浓度明显高于接种卡介苗所产生的38KD浓度,所以病人在采用蛋白的芯片检测结核病时不必担心结果是受到接种卡介苗的影响。
TB芯片临床意义
指标名称
可能结果
TB 结果1结果2结果3结果4结果5结果6结果7结果8
LAM + - - + - + + -
16KD + - - - + + - +
38KD + - + + + - - -
结果1:确定为结合分支杆菌感染;
结果2:①未感染(在没有体征的情况下);
②重症病人体内也无法检查出抗体;
结果3:可能被感染;
结果4:可以确诊为结核患者;
结果5:已被感染且正在感染(可通过38KD证明正在被感染);
结果6:①有可能接受接种卡介苗
②若没接种卡介苗,即说明感染结核;
结果7:疑似感染,结合体征可判断是否感染结核;
结果8:可能接种过卡介苗,不是结核感染;如果被检人员没有接种过卡介苗。说明被检人员感染过结核,但现已治愈;
【1】结核蛋白芯片联合PPD检测对 痰菌阴性肺结核的诊断价值
作者:作者:郭光云, 陈 功, 王家宁, 郭凌云 作者单位:郧阳医学院附属人民医院