【求助】转膜后maker条带很淡

各位做过WB的前辈们，在下有个问题想请教下，我做WB一个月了，转膜这一坎怎么也跨不过去。目的蛋白是92KD,内参是42KD,用的是湿转，转膜时间从20分钟到1.5小时都试过了，膜上的maker条带很淡，立春红染不出来，但是胶很干净，考马斯亮蓝染色也不显色。怀疑转过头了，试过用两层PVDF膜转20分钟，结果两张膜上都有条带，浓淡程度差不多，而且两张膜上的内参都能曝出了，目的还没有出来。现在想请教的问题是，为什么我用的是和同学一样的pvdf膜，转膜液也是相同的配方，操作手法相差也应该不大，别人转过来的条带很清楚，我的很淡，而且容易都转过头，原因在哪里，实验室没有人像我这样的，如果是按照20分钟转，92KD的蛋白会不会转不上去。望前辈们赐教，谢谢！