【求助】关于成年大鼠脑片制备

请教各位前辈，我们刚开始摸索做成年大鼠，可是脑片很不理想，每次脑片经过recovery之后活性很不好，一眼看上去能封接的细胞几乎都没有，也试过recovery之后再室温孵育，也是不行，请问哪位高手能否指点一下，万分感谢（recovery温度35℃，记录槽温度30-33℃，室温25-26℃，大鼠灌注切片孵育均是ACSF液，（之前试过髙糖的cutting solution也不行细胞都死光啦）
请各位有经验的前辈指点一二，我们做了有快一个月了，一直都不太好，在P30左右的大鼠脑片经孵育后可以看到细胞数量还可以但是形态都不好，封接困难，偶尔能封上的记录时间撑不过30min，年龄更大的就别提了，紧急求助各位，万分感谢！