【NEJM】变革时代：结核病快速分子检测

变革时代：结核病快速分子检测

Tangdl2000编译

2010年9月9日《新英格兰医学杂志》全文公布了一种2小时之内快速检测结核病的诊断方法。资助这一研究的比尔和梅琳达•盖茨基金会1日表示，世界卫生组织今后几天将与研究人员接洽，评估研究成果。
这种新的诊断方法和试剂盒（名字：Xpert MTB/RIF）由美国Cepheid公司（ http://www.cepheid.com/ ）开发，主要原理还是提取DNA后序列分析耐利福平分枝杆菌株rpoB基因81个碱基的核心区域。（引物：上游 CGTGGAGGCGATCACACCGCAGAC；下游AGCTCCAGCCCGGCACGCTCACGT)

主要结果：
1）对秘鲁、阿塞拜疆、南非和印度的1730名结核病疑似患者进行的测试显示，这一方法能够鉴别出大约98%的确诊病例，其中对涂片阳性的患者的检出率为98.2%（551/561），对涂片阴性的患者的检出率为72.5%（124/172），如果复检两次或三次，还能使涂片阴性培养阳性的患者的检出率达到90.2%，而且在非结核对照中的的特异性达到99.2% （604/694）。2）对利福平耐药患者检出率达到97.6%（200/205），对利福平有效患者检出率达到98.1%（504/514）

背景知识：
1）结核病：
属于慢性传染病，由结核杆菌引起，其中肺结核病最为常见。世界卫生组织的数据显示，自2004年以来，结核病发病率和死亡率均逐步下降，但目前全球仍有三分之一的结核病患者得不到及时、准确地诊断和治疗，每年近200万人因此死亡。此外，在一些发展中国家和地区，结核病和艾滋病双重感染的比例非常高。结核病还是因病致贫、因病返贫的主要疾病。结核病还是一种人畜共患传染病。结核病不仅是一个公共卫生问题，也是一个社会经济问题。

2）结核菌：
由科克（Robert Koch）于1882年发现的。结核杆菌为细长或略弯曲的杆菌，长1.4微米，宽0.2～0.5微米。在陈旧的培养物中或干酪化的淋巴结中可见到分枝状。在人工培养基上，由于菌型、菌株和菌龄的不同可呈现出不同形态，如球状或丝状等。结核杆菌主要通过呼吸道和受损伤的皮肤侵入易感染机体。

3）多药耐药结核病（MDR Tuberculosis）：
指用目前标准的药物治疗方案已无疗效。根据世界卫生组织报告（ http://www.dxy.cn/bbs/thread/16817257?&keywords=%BD%E1%BA%CB%B2%A1%BF%EC%CB%D9%D5%EF%B6%CF ），2008年，全球新增940万结核病病例，其中大约44万例为多重耐药性肺结核，这44万病例中的一半发生在中国和印度。然而相对而言，这一问题在一些东欧国家和前苏联加盟共和国中最为严重。例如，在俄罗斯的摩尔曼斯克、普斯科夫和阿尔汉格尔斯克——均位于该国的西北部——的肺结核病人当中，分别有28%、27%和24%为多重耐药性肺结核病例。这是迄今为止的最高纪录，之前为2007年阿塞拜疆巴库市的22%。与此同时，经过多方努力，相同的问题在俄罗斯的奥廖尔、托木斯克，以及爱沙尼亚和拉脱维亚得到了部分缓解。

4）利福平：
福平为利福霉素类半合成广谱抗菌药，对多种病原微生物均有抗菌活性。该药对结核分枝杆菌和部分非结核分枝杆菌（包括麻风分枝杆菌等）在宿主细胞内外均有明显的杀菌作用。利福平对需氧革兰阳性菌具良好抗菌作用，包括葡萄球菌产酶株及甲氧西林耐药株、肺炎链球菌、其他链球菌属、肠球菌属、李斯特菌属、炭疽杆菌、产气荚膜杆菌、白喉杆菌、厌氧球菌等。对需氧革兰阴性菌如脑膜炎奈瑟球菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟球菌亦具高度抗菌活性。利福平对军团菌属作用亦良好，对沙眼衣原体、性病淋巴肉芽肿及鹦鹉热等病原体均具抑制作用。细菌对利福霉素类抗生素有交叉耐药。利福平与依赖DNA的RNA多聚酶的β亚单位牢固结合，抑制细菌RNA的合成，防止该酶与DNA连接，从而阻断RNA转录过程，使DNA和蛋白的合成停止。

5）结核杆菌培养基的种类及应用
参见： http://journal.shouxi.net/html/qikan/nkx/zhxdnkxzz/2006434/zsyjz/20080901010119263_159430.html

6）比尔和梅琳达·盖茨基金会(Bill & Melinda Gates Foundation)
比尔和梅琳达·盖茨基金会是由比尔·盖茨与梅琳达·盖茨夫妇资助的、全球最大的慈善基金会。该基金会以美国华盛顿州西雅图市为基地，于2000年1月，通过盖茨学习基金会和威廉·盖茨基金会的合并而创立。威廉·盖茨（比尔·盖茨的父亲）和Patty Stonesifer为基金会会长。该基金会现有资金约270亿美元，而每年必须捐赠其全部财产的5%，也就是多于10亿美元。

7）Cepheid公司

附件为全文，同期评论以及一篇综述关于当前多药耐药结核病的流行病学综述