【求助】Western blot 背景太深怎么办？
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第一次做Western blot，之前摸索过电泳，转膜的条件，染色后显示转膜比较成功，条带清晰，昨天转膜后用5%脱脂牛奶进行封闭，室温2h，随后洗膜5min*3次，用封闭液稀释一抗1：1000（Abcom公司），4度过夜，洗膜5min*3次，再加入二抗1：2000，室温2h，洗膜5min*3次。显色我是用ECL试剂，曝光1min，显影4-5min，定影8min，结果在暗室里就能看到整张膜发亮，定影后膜的位置一片黑色，都不知道有没有条带，这是为什么呢？怎么办？
