最简单、最高效、最省时的大肠杆菌感受态细胞制作方法。
发布于 2004-07-18 · 浏览 4773 · IP 重庆重庆
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这种方法至少适合以下菌株：
DH5a TG1 m15 XLI-blue
1.溶液 1×TSS 缓冲液：
10％ PEG( MW=3350~8000)(以3350较好)
10% DMSO
100 m M MgCL2
用LB 培养基配制，PH 6.5~6.8.
2. 按1：100 比例将过夜培养的菌液（16h）加入到新鲜的LB培养基中，于37 ℃振荡培养至OD600=0.3~0.4(2h40～50min)。4度离心10min（或者4度，4000rpm，5min），弃上清，收获细菌。原培养物体积的1/10 体积的1× TSS 液(冰预冷)悬浮细胞，然后分装成150 ul/份，冰上操作，－80度保存。
如有疑问，请通知我
DH5a TG1 m15 XLI-blue
1.溶液 1×TSS 缓冲液：
10％ PEG( MW=3350~8000)(以3350较好)
10% DMSO
100 m M MgCL2
用LB 培养基配制，PH 6.5~6.8.
2. 按1：100 比例将过夜培养的菌液（16h）加入到新鲜的LB培养基中，于37 ℃振荡培养至OD600=0.3~0.4(2h40～50min)。4度离心10min（或者4度，4000rpm，5min），弃上清，收获细菌。原培养物体积的1/10 体积的1× TSS 液(冰预冷)悬浮细胞，然后分装成150 ul/份，冰上操作，－80度保存。
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最后编辑于 2004-07-19 · 浏览 4773
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