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【求助】如何更好设计细胞凋亡机制的实验?

最后编辑于 2022-10-09 · IP 湖南湖南
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这个帖子发布于 16 年零 223 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
目的:拟观察某药物A对胰岛β细胞的保护作用,探讨其对β细胞凋亡及对胰岛素分泌功能的具体分子机制(或通路)。
目前已通过体外培养NIT-1细胞株,细胞因子诱导、A药干预,采用MTT、Hoechst33342染色、caspase-3活性测定、Annexin V-FITC/PI凋亡率检测等方法,观察到了A有抑制细胞因子诱导凋亡和恢复胰岛素分泌的保护功能。
现在的问题是:想进一步探讨A药的具体抗凋亡机制,但在设计下一步实验时总找不到满意的idea,自己在看了众多有关凋亡机制文献摸索了两个月后却越发糊涂,感觉细胞凋亡的机制甚是复杂,通路众多,经典的如PI3K/AKT-NF-KB等通路似已被做烂,估计到我做出来,早发不出文章了。所以想请高手指点,近期在细胞凋亡机制上有无最新通路或新蛋白发现,或如何设计才稍有新意,能在一两年内还能发个低IF值的Paper也好啊。
广泛征集意见建议。
非常感谢!



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