【求助】CEF测OD值多次特大但没有污染,不知为何?
最后编辑于 2022-10-09 · IP 江苏江苏
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我们实验室一般用的都是鸡胚成纤维细胞,进行中药安全浓度的测定,所用营养液MEM,5%小牛血清,1%双抗,NaHco3调PH至中性。以前我们测的值都在0.2-0.5之间,感觉都挺正常。但是最近我们做时发现每次的结果都非常高,甚至对照组都能达到1点多。但是我们检查过并没有污染,当初我们假设几种情况:1、细胞污染,由操作过程中人为原因造成的;2、最终配好的营养液有问题,因为有时我们配好放置的时间较长;3、小牛血清有问题;4、所加中药有问题,可能高压除菌不完全;5、细胞培养时每空所加细胞密度过大等
我们觉得能够考虑的方面都想到了,但是从上学期末一直到现在我们的数据一直都偏大,都在0.5-1.1之间,最不解的是每次细胞对照都偏大,一般比中药组高出0.2-0.3左右.试验期间所用的材料及人员经常更换,不可能每次的失误都是一样吧.
而且每次最后测数值时也没有发现污染,真不知哪里出错了?
请问各位同仁是否也碰到过此类情况,这个问题已经困扰我很久,特向大家求助.谢谢!