（求助）ELISA结果分析问题

我是做ELISA的新手，今天第一次做ELISA,请教大家帮我分析一下结果，万分感谢：
目的：测定血清中OVA(卵清蛋白)特异性IgE
步骤：（按文献）
1.0.01％OVA4℃包被过夜
2.PBST洗板5分钟×3次
3.含1％BSA的PBS封闭，37℃下2小时
4.PBST洗板5分钟×3次
5.分别加入1：5，1：10，1：50血清200μl，37℃下2小时（共五个标本）
6.PBST洗板5分钟×3次
7.加入抗IgE抗体（HRP）（用PBS稀释1：1000）200μl，37℃下2小时
8.PBST洗板5分钟×3次
9.加入DAB显色液200μl，20分钟后加入2mmol/L硫酸终止反应
10 酶标仪测吸光度（波长450）
结果
1：5 1：10 1：50
标本1 0.271 0.265 0.269
标本2 0.320 0.313 0.296
标本3 0.294 0.316 0.953
标本4 0.361 0.407 0.354
标本5 0.316 0.460 0.585
空白 （包被后只加加DAB）0.400
其中标本1为阴性标本，另外各标本有不同程度的溶血
请教：
1.如何设立阳性对照和阴性对照？
2.如何判断为阴性或阳性？
3.为什么稀释度越大，吸光度反而越大？
4.空白管吸光度为何这么大？