(求助）ELISA求教
发布于 2004-04-09 · 浏览 2059 · IP 浙江浙江
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我用ELISA法测大鼠TNF-a，
用的是美国API公司的ELISA试剂盒
采用其说明书上写的步骤：
1。酶标孔内加10ul标准液或血清
2。加40ul一抗和40ul二抗，混匀静置40min
3。用其配备的洗涤液洗涤5次
4。加100ul显色剂，混匀静置20min
5。加100ul终止液，混匀后在450nm下测OD值
结果标准曲线还可以，但我的血清样本确都是零，数字比较均一
怎么回事？
我的血清采自急性重症胰腺炎模型大鼠，取血清后置于－20冰箱保存
今天在室温下冻溶的
标准液浓度为0 50 100 250 500 1000
按文献我的血清TNF水平应该在200～300左右啊
不知道哪里有问题？
用的是美国API公司的ELISA试剂盒
采用其说明书上写的步骤：
1。酶标孔内加10ul标准液或血清
2。加40ul一抗和40ul二抗，混匀静置40min
3。用其配备的洗涤液洗涤5次
4。加100ul显色剂，混匀静置20min
5。加100ul终止液，混匀后在450nm下测OD值
结果标准曲线还可以，但我的血清样本确都是零，数字比较均一
怎么回事？
我的血清采自急性重症胰腺炎模型大鼠，取血清后置于－20冰箱保存
今天在室温下冻溶的
标准液浓度为0 50 100 250 500 1000
按文献我的血清TNF水平应该在200～300左右啊
不知道哪里有问题？
最后编辑于 2004-04-19 · 浏览 2059
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