【求助】关于image pro plus的若干问题

各位战友好，在这里看到了很多关于IPP的帖子，但是可能由于自己是新手，从来没有接触过，还是有学多问题不明白，希望各位不赐吝教。

我最近有一些实验数据要处理，就是检测荧光的定量检测，因为有不同的样品数据要分析，看过火锅在DXY上面相关的帖子
http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/2097125_1.html

很受益，不过也有很多疑问，希望你能够于百忙之中予以解答，将感激不进。

首先，火锅说说在HSI格式下，绿色对应的灰阶值为50－115，我想知道灰阶值是不是指下面的颜色，因为颜色明显的上下分为好几条带，请问灰阶值是对应哪一条带，是不是最上面的那条呢？或者选择的时候是看图片的选择部分的变化？

另外在图片处理完成后（是将背景去除后），为什么要将图片格式转化为Gray-Scale8模式，这一点不是很明白。

我将上面的图片下载下来以后，按照您的方法处理，得出的结果和您给出的不是太一样，我的灰阶值选择和你的一样（50－115），面积计算和你的一样，都是67171，然后进行荧光强度计算，我的方法是点击report中statistics按钮，然后的出的结果是SUM:877729.但是你在帖子里面给出的结果是917332，不知道是不是我的做法有问题，并且计算SUM的时候，我不能选择范围，其默认的范围是X MIN 0,X MAX 156.你在帖子里面说，荧光强度的范围应该是1－255，可是我不能选择范围（第三张图片），不知道如何选择范围还是不用选择范围，系统回自己自动计算可以检测到荧光的量。（我最不理解这个原因，我完全按照帖子上面的方法进行，但是结果却不一样，不知道是不是操作的原因还是软件本身的问题。我将我用软件进行处理的图片放在下面了）。

还有，对于HSI模式下选择你计算的部分，S通道和I通道的作用是什么，是有一般的选择数值还是要自己摸索。

对图片进行处理以后，其H值会改变，如果要进行下一步处理，是否要将H值重新改变。

最后想争取一下大家的的意见，对于荧光的定量检测，除了拍照用
IPP分析意外，有没有什么好的分析方法？例如细胞流式计数？不知道荧光光度计可以吗？这方面的知识比较匮乏，知道您是玩显微镜的，可否给点专业意见？