【求助】有关LPS的标板问题!:ELISA讨论区
ELISA 的起始步骤是将抗原附着于塑料微量反应板的反应孔表面。抗原包被的效率即最终结合于塑料表面的抗原密度及其稳定性决定了随后结合抗体的数量, 亦即决定了EL ISA 的敏感性和特异性。为增加L PS 的包被密度而提高包被溶液的抗原浓度可能使费用昂贵,因此LPS的包被方法显得非常重要。LPS本身很难溶于水,并且有很多在溶液里是附壁的。对纯品LPS的处理文献报道很多方法,有用三乙胺的无热原水溶解LPS,使其浓度经超声处理后包板。有将LPS以0. 1 mol/ L NaHCO3 (pH8. 6) 稀释至50 μg/ ml ,还有用0.05mol,pH 值9.6的磷酸盐缓冲液配成20μg/ml LPS. 还有将LPS用0.02 mol /L pH 7.4 的PBS 包被液稀释为4μg/ml.每孔100μl包被酶联板包被96 孔酶联板, 4 ℃24 h(湿盒中).还有些未列举出来。这么多方法,差别又那么大,简直把人弄糊涂了,不知道哪位大虾做过这方面的给提提宝贵意见!哪种方法标板效果要好些?(我做过一点,但效果感觉不是很好。但又不想稀里糊涂地蒙骗自己和别人。做科学还是要有良心嘛。)