求助：HPLC
发布于 2019-02-25 · 浏览 2634 · IP 广东广东
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用HPLC测亚精胺标准品测了好几次都没成功，我的衍生步骤为：我用的是0.4mol/L的三氯乙酸稀释亚精胺浓度为20mg/L，然后取1mL亚精胺稀释液+400uL的NaOH（1mol/L）+450ul的饱和NaHCO3+2ml的丹磺酰氯（5mg/ml），然后避光水浴40℃，45min，然后加150ul氨水去除多余的丹磺酰氯，然后放置室温30min，然后加1ml甲醇，最后用0.22um的针头滤器过滤上样。色谱状况为：流动相：水（40%）-甲醇（60%），流速1ml/min，分离时间30min，进样体积10ul，柱温40℃。
图1是标准品的图，图2是甲醇（60%）跑的图，图3是水的图，三张图衍生条件是一样的。
测了很多次都不成功，求大神指教哪环节出错，还是哪个条件不对，为啥会出不了亚精胺的峰？
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2634
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