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用 TOSOH G3000SWxl测定蛋白分子量纯度结果与电泳结果差异大

发布于 2016-11-08 · 浏览 5258 · IP 浙江浙江
这个帖子发布于 8 年零 192 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

如题,小弟最近在做一蛋白,利用电泳和SEC分别鉴定其分子量纯度,发现两者对应不上,特来请教。 

电泳产用invitrogen的BIS-TRIS 8-12%预制胶,前三道非还原,后三道还原 所得结果如图 。 

 目的蛋白理论分子量约90Kd,电泳图中有约150Kd及22Kd的杂带,此图与预期吻合


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但产用TOSOH  G3000SWxl分离时 只出一个峰(按电泳结果至少三个峰),且出峰位置分子量约150Kd ,色谱条件为200mM PB6.8 , 用BIORAD 标准Mark对照,同时进了一针理论分子量为44的蛋白,出峰位置基本一致 图谱如下

img

特请教各位战友,关于这两种方法测定结果差异的原因,SEC的结果出峰位置不对且峰数量少?

最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 5258

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