【讨论+求助】小鼠侧脑室注射入门

昨天第一次在离体定位仪上练习侧脑室注射，计划是4%水合氯醛麻醉后，固定在离体定位仪上，去毛，切开头部皮肤，暴露前囟（B），通过文献查找的坐标加自己在图谱上确定的坐标（前囟后0.3，旁开1，深度2.5mm），定位后钻孔，使用5μL微量注射器2μL（按照文献上描述的速度，用时5min，留置5min，在10min内退出注射器），然后立即处死小鼠，取脑。但是并没有观察到针道以及注射药物的痕迹~~

原因分析：1：使用5μL上海高鸽微量进样器，其针尖斜面部分的长度几乎达2mm，影响进样位置的准确性

2：墨汁杂质较多，扩散性差

3：注射出针后出血多（基本上有2-3mL了，当时我都担心小鼠脑缺血），但是为什么出血多呢，难道是位置不对，但是有文献和图谱支持，以前囟为X，Y，Z坐标0点~

故而已经自己磨改了进样器，把墨汁换成苏木精，自己在找出血多的原因~~希望各位前辈多多赐教，帮忙分析原因；跟我一样开始实验的互相讨论，大家共同进步~

PS：另附实验坐标文献来源、图谱截图以及实验图片~

我会跟随自己实验的脚步，跟帖总结提问哒，慢慢来慢慢来~~