流式和间接免疫荧光检测鱼类sIgM+细胞

      各位大神，我在提取鱼类白细胞，利用抗IgM抗体做流式，在荧光显微镜下发现荧光在细胞上呈点状分布，有些不正常。提出白细胞后，立即沉降固定，细胞变大，做间接免疫荧光无阳性信号；白细胞在4度放置1d后，沉降固定，部分细胞变大，做间接免疫荧光未变大细胞部分呈阳性，阳性信号不呈点状分布，与以前结果相似，请问这种情况可能是哪方面的原因，应该怎么解决？

另外，应该可以排除抗体问题，一抗我使用鼠多抗和单抗效果基本一样，以前提取白细胞沉降固定的片子，鼠多抗和单抗的间接免疫荧光效果俱佳，怀疑是白细胞提取时出现问题，但是不知道那里有问题，求教大神。