求教干酪乳杆菌细胞壁提取方法
干酪乳杆菌细胞壁提取物的制备
干酪乳杆菌细胞壁提取物(Lactobacillus caseicell wall extractive,LCWE)的制备:取干酪乳杆菌菌粉适量,加入磷酸盐缓冲液(phosphate bufferedsaline,PBS),以3 500×g 离心10min,弃上清液,洗涤6次后取沉淀物;加入4%SDS,室温过夜,裂解细菌;再离心弃上清液,加入PBS,反复洗涤及离心10次,弃上清液,留取沉淀物;然后依次加入250μg/ml RNA酶、250μg/ml DNA酶和50μg/ml的胰蛋白酶,每次均置于37℃培养箱中孵育4h,然后用PBS洗涤2次,弃上清液留取沉淀物;取沉淀物,加入PBS适量后,置于冰浴中,应用超声细胞碎裂仪处理2h,振幅20,频率25次/s,超声10s停5s;将超声处理后的溶液分装入EP管中,超速(12 000×g)低温(4℃)离心1h,取上清液即为LCWE。经苯酚/硫酸比色法,以检测LCWE 中鼠李糖的浓度,并用PBS将其浓度调整为1.0mg/ml,实验备用。
摘自.阿司匹林对川崎病小鼠的治疗作用及其机制研究
这个方法好操作吗?可行吗,因为从来没有养过菌,所以请教各位同行专家,帮我看看这篇文献的方法可行吗?谢谢了
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2151