求助：关于PBMCs的几个问题
发布于 2016-01-29 · 浏览 1.0 万 · IP 江苏江苏
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近期准备做PBMCs分离，提RNA和蛋白，此前没有实验基础，也没有师兄师姐教，有几个问题想问下各位群友们，有的问题比较弱智，请见谅：
1.做RNA和蛋白的话，外周血各需要多少ml？（看文献和群里查的 提RNA的话3-5ml。提蛋白的话，有3ml，15ml，还有20ml）如果血太多，临床上不好收。
2.抗凝的问题：肝素、枸橼酸、EDTA都行吗？
3.分离用的试管需要用玻璃的还是用无酶的EP管？如果是玻璃的试管话，需要提前处理吗？
4.想先收血，再集中提蛋白和RNA。提RNA的话，把PBMCs提取后加入Trizol，-80℃冻存。加多少量的Trizol？有文献说调整PBMCs细胞数后至4*10^6，加1ml.还是可以不用测细胞数，直接加1ml？
提蛋白的话，把PBMCs提取后血怎么处理下，再冻存？
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 1.0 万
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