重组人透明质酸酶的应用

 介绍一下最近几年比较火的（Halozyme公司）辅料蛋白-重组人透明质酸酶。
透明质酸酶（hyaluronidase，HAase）属于催化降解透明质酸的酶家族，透明质酸是胞外基质的必须组分。透明质酸酶能使透明质酸产生低分子化作用，从面降低透明质酸的活性和粘度，提高组织中液体渗透能力。
目前市售的HAase多为从动物（牛、羊）睾丸组织提取的，提取法制备的HAase往往具有纯度低、杂蛋白含量过高和免疫原性较强等缺点。利用基因工程重组表达技术制备人透明质酸酶（rhPH20）具有纯度高、活性高等优势。
目前市场上仅售的人源的PH20重组蛋白产品，为海洋酶（Halozyme）公司生产的Hylenex，于2005年获得FDA批准上市，价格低于之前几家公司的动物源透明质酸酶产品。由于这种重组人源的蛋白酶的活性好，效率高，并且安全性好，已分别有罗氏、百特、辉瑞等公司与Halozyme公司合作，采用这种蛋白酶作为皮下注射的辅料制剂，用于改善
他注射用药物的渗透和增加其他药物的组织渗透性和促进扩散或分散。
美国FDA于2005年批准了Halozyme公司的人重组透明质酸酶药物HYLENEX® 。HYLENEX的重组人透明质酸酶组分为447aa(35-482aa)的多肽，分子量为61kD，该酶是由带有人重组透明质酸酶PH20质粒的CHO （Chinese Hamster Ovary ) 细胞重组表达. 为无菌澄清无色即用液体。
以下是Halozyme公司的人重组透明质酸酶平台应用：
1， 加速治疗性抗体的吸收：HerceptinSC（roche）
Roche和Halozyme公司在2006年签订了协议，在Roche的8种生物制品中使用Halozyme的人重组透明质酸酶PH20平台。其中SubcutaneousHerceptin®and subcutaneous MABTHERA®处于临床III期， 而subcutaneous Actemra® 已经完成了临床I期研究。
2012年3月，Roche向EMA提出HerceptinSC 治疗HER2-positive 乳腺癌，并于2013年6月28日得到EMA 批准Herceptin SC在欧洲上市。
Mabthera SC：2014年EMA批准了rituximab(Mabthera)与 rHuPH20的皮下注射剂型。
2， 促进胰岛素吸收
Danielet.al 报道赖脯胰岛素（20 U of insulin lispro+300U of rHuPH20 (11.3 μg/mL) in 220 μL）和普通胰岛素（20 U of regular humaninsulin+240 U of rHuPH20 (10μg/mL) in 200 mL）在搭配人重组透明质酸酶后，赖脯胰岛素和普通胰岛素tmax 分别减少了 51%和58%， Cmax分别增加了90% and 142%。（Diabetes Technol Ther.2009Jun;11(6):345-52 Accelerated pharmacokinetics and glucodynamics ofprandialinsulins injected with recombinant human hyaluronidase）