【求助】永生化角质形成细胞HaCaT消化传代问题
我养HaCaT 也有一段时间了,但最近两次细胞消化传代很有问题。含EDTA的0.25%胰酶消化十几分钟都还是不下来(以前25的小瓶,加2ml胰酶直接放37度5分钟,再晃晃轻敲几下后,细胞就像细沙一样下来了),镜下看细胞都缩成圆鼓鼓的了,却还是怎么吹怎么敲也不掉下来,却有很多像胶一样的团絮物(角质?)漂浮在胰酶里。再到后来终止消化后却都是细胞碎片了,最近两次传代细胞都没成活,从来没有这种情况了,现在急啊,快崩溃了。到底是细胞老化了?还是别的问题?向大家请教啊~