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【求助】破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色的原理问题!

发布于 2012-03-15 · 浏览 3.2 万 · IP 日本日本
这个帖子发布于 13 年零 52 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
第一种解释:TRAP染色反应 抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)为破骨细胞的特异性标志酶,应用偶氮偶联组化分析法酶活性部位显示红色反应。以萘酚二磷酸盐为底物,偶氮副品红为显色剂,TRAP在酒石酸钾钠存在条件下将萘酚AS-BI磷酸盐水解为萘酚AS-BI,与显色剂结合形成红色沉淀"
第二种解释:用纯化的大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP),再与HRP 标记的抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。
第三种解释:测试孔内已包被抗TRACP 单克隆抗体→加入校准液、质控品和样品→加入释放剂→有活
性的TRACP 5b 从结合蛋白质上离解→TRACP 5b 与孔内包被的抗TRACP 单克隆抗体结合→
加入底物pNPP 温育→加入终止液终止反应→在酶标仪上检测结果。
这3种解释不是一回事吧?
我一直没弄明白.破骨细胞里含有抗酒石酸酸性磷酸酶,那么直接往样品里加入酒石酸酸性磷酸酶,然后再显色不就可以了吗?
有研究破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP)的前辈帮助指点指点!
谢谢!







最后编辑于 2012-03-15 · 浏览 3.2 万

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