【求助】求助巨噬细胞M1及M2表型的诱导方法,做过类似实验的前辈请帮忙解答
课题刚开展,首先做的是巨噬细胞亚型的诱导,用的是经典的方法:原代培养髓源性的巨噬细胞,后分别给予LPS(100ng/ml),sigma公司的,及IFN-γ( peprotech)10ng/ml联合l诱导成为M1;以IL-4 (peprotech)10ng/ml诱导成为M2。通过检测M1及M2的各自标志来确定是否诱导成功。检测结果iNOS的表达分别为50及45,对照组不加诱导因子iNOS表达为40,以肿瘤细胞上清诱导成为肿瘤相关的巨噬细胞iNOS的表达为180.(iNOS为M1的标志),以上结果认定为诱导不成功。请做过相似实验的前辈指导这个实验的注意点有哪些?还有LPS的最大剂量为多少?
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2.2 万