【求助】多聚甲醛固定的细胞能用胰蛋白酶消化吗?
各位实验高手们,你们好!我有一问题求教各位。我最近在做流式细胞仪,常用的方法是将细胞先用胰蛋白酶消化下来,然后用多聚甲醛固定,经过多次洗涤和加一抗,二抗,细胞损失太大了。我于是想通过向用多聚甲醛固定后,在洗涤加抗体的方法去做,最后再消化的方法去做,不知道可行?我所担心的是1)多聚甲醛固定的细胞是否可以用胰蛋白酶消化;2)如果可以的话,胰蛋白酶对荧光是否有影响;我查阅了一些资料,说是可以用细胞刮子去刮细胞。有谁做过这样的实验吗?请教了。谢谢!
各位实验高手们,你们好!我有一问题求教各位。我最近在做流式细胞仪,常用的方法是将细胞先用胰蛋白酶消化下来,然后用多聚甲醛固定,经过多次洗涤和加一抗,二抗,细胞损失太大了。我于是想通过向用多聚甲醛固定后,在洗涤加抗体的方法去做,最后再消化的方法去做,不知道可行?我所担心的是1)多聚甲醛固定的细胞是否可以用胰蛋白酶消化;2)如果可以的话,胰蛋白酶对荧光是否有影响;我查阅了一些资料,说是可以用细胞刮子去刮细胞。有谁做过这样的实验吗?请教了。谢谢!