【求助】DC细胞培养过程中遇到的问题,请大侠释疑?
我已经杀了三只BABLc小鼠取其骨髓,无菌状态下取出其股骨及胫骨,去除肌肉及血管组织,剪断骨头两端,用含有2ml的R10冲洗后,过滤后,收到15ml离心管,以1:10加入37度预温的红细胞裂解液,反应2-5分钟后再加入RPMI1640中止反应,这时离心管有12ml液体,总共收到三管,进行离心,1500转/分钟,5分钟,问题出来了,这里根本看不到细胞沉淀,然后我加到3600转/分钟,5分钟,才看到有一点离心沉淀物,收集后按常规加入20ng/mlGM-CSF,10ng/mlIL-4,隔日换液,但是在第六天,根本看不到集落,都是贴壁细胞,看过园子中大家的讨论后知道那可能是巨噬细胞或者其他组织细胞,很失落,钱花了不少啊,老板那不好交代啊,各位大侠请指正我的操作问题,万分感谢!基本是按照下面这篇文章过程来搞的!
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 4656