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【求助】DC细胞培养过程中遇到的问题,请大侠释疑?

发布于 2011-03-18 · 浏览 4656 · IP 广东广东
这个帖子发布于 14 年零 66 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
看到很多大侠在园子里讨论树突细胞的问题,知道很多高手在其中,故想请教一番:

我已经杀了三只BABLc小鼠取其骨髓,无菌状态下取出其股骨及胫骨,去除肌肉及血管组织,剪断骨头两端,用含有2ml的R10冲洗后,过滤后,收到15ml离心管,以1:10加入37度预温的红细胞裂解液,反应2-5分钟后再加入RPMI1640中止反应,这时离心管有12ml液体,总共收到三管,进行离心,1500转/分钟,5分钟,问题出来了,这里根本看不到细胞沉淀,然后我加到3600转/分钟,5分钟,才看到有一点离心沉淀物,收集后按常规加入20ng/mlGM-CSF,10ng/mlIL-4,隔日换液,但是在第六天,根本看不到集落,都是贴壁细胞,看过园子中大家的讨论后知道那可能是巨噬细胞或者其他组织细胞,很失落,钱花了不少啊,老板那不好交代啊,各位大侠请指正我的操作问题,万分感谢!基本是按照下面这篇文章过程来搞的!

小鼠骨髓来源树突状细胞的分离与扩增培养.pdf (289 KB)

最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 4656

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