【求助】神经胶质细胞纯化问题请教
这个帖子发布于 14 年零 341 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
我提取胶质细胞步骤基本上是按园子里介绍的，但是下面两个步骤不是很理解，望有经验的老师赐教：
（1）收集沉淀用含10% FBS的DMEM培养基重悬，调整细胞密度至1.5×106/ml，种植于75cm2培养瓶，经1小时差速黏附去除成纤维细胞后，将细胞悬液转移到一新的75cm2培养瓶继续培养，两天换液一次。
问：在进行差速黏附的细胞瓶需要预先铺多聚赖氨酸吗？
（2）7天后将培养瓶放入水平摇床，260rpms 2小时 37℃,换液弃除小胶质细胞，放入培养箱平衡1小时，重新置于水平摇床，260rpms 18小时37℃，换液弃除少突胶质细胞，
问：我在摇床上220rpm，过夜后发现我的细胞全都漂上来了，想请教一下这是什么原因？另外不摇的话小胶质细胞和少突胶质细胞的比例大不？ps：细胞瓶铺了50ug/ml的多聚赖氨酸。
谢谢
（1）收集沉淀用含10% FBS的DMEM培养基重悬，调整细胞密度至1.5×106/ml，种植于75cm2培养瓶，经1小时差速黏附去除成纤维细胞后，将细胞悬液转移到一新的75cm2培养瓶继续培养，两天换液一次。
问：在进行差速黏附的细胞瓶需要预先铺多聚赖氨酸吗？
（2）7天后将培养瓶放入水平摇床，260rpms 2小时 37℃,换液弃除小胶质细胞，放入培养箱平衡1小时，重新置于水平摇床，260rpms 18小时37℃，换液弃除少突胶质细胞，
问：我在摇床上220rpm，过夜后发现我的细胞全都漂上来了，想请教一下这是什么原因？另外不摇的话小胶质细胞和少突胶质细胞的比例大不？ps：细胞瓶铺了50ug/ml的多聚赖氨酸。
谢谢
