【求助】求解。。体外抗氧化实验
发布于 2009-09-11 · 浏览 1587 · IP 浙江浙江
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小弟目前在做PEG修饰的姜黄素抗氧化活性研究。通过查阅文献和实验室现有条件。就决定做除羟基自由基方面。我按照文献的做法和fenton体系反应原理。选择 FESO4 (9mmol/l)、H2O2(8.8mmol/l)、用水杨酸做捕获剂,在510nm测吸光度。体系做的还行,在510nm左右有明显吸收峰。加Vc以后吸收峰消失。但是我用了姜黄素以后510nm处峰不但没有消失或变低,反而升高了。显示出姜黄素有促进氧化作用。但许多人已经报道姜黄素的抗氧化活性。结果我用脂质过氧化实验来做姜黄素。能比较好的反映其抗氧化活性(峰明显但吸光度很低。不到0.1)。后来我把fenton体系改成用0.15mol/l ph=7.4 的PBS 、1.5mmol/l EDTA-Fe 、5%H2O2、600ug/ml水杨酸体系。加姜黄素后出现明显的羟基自由基清除。但是吸光度很低P(0.2左右),而且最后的体系里是白色乳状液体。加到石英比色皿中时看到里面一直冒着细小气泡。而且数据重现性很差。小弟又加了PEG修饰的姜黄素。虽然有存在较明显清除作用,但是做不出量效关系。
请各位大侠赐教, 怎么解决气泡问题?fenton体系怎么优化才能做出好的量效关系来?
别人文献里都是只有拿清除率来说明问题,我想知道这个体系的吸光度能达到多大呢?还有卵磷脂的脂质过氧化实验吸光度也很低时为什么呢 ?(3.5mmol/lEDTA-FE,12mmol/l卵磷脂,28%TCA(W/V),1%TBA(W/V)体系)。
小弟在此不胜感激。。。
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 1587
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