西综笔记-生物化学-DNA 重组和重组 DNA 技术
一、工具酶1. 常用工具酶限制性核酸内切酶（Ⅱ 类）：识别 DNA 特异回文序列并在识别位点切割，不切割细菌自身 DNA（通过甲基化酶修饰保护自身），用于重组 DNA 技术。DNA 连接酶：连接双链 DNA 单链缺口，催化形成 3',5'- 磷酸二酯键，用于冈崎片段连接及目的基因与载体连接。逆转录酶：以 mRNA 为模板合成 cDNA，用于目的基因合成（如 RT-PCR 技术）。Klenow 片段：原核生物 DNA 聚合酶 Ⅰ 水解产物，保留 5'→3' 聚合酶活性及 3'→5' 外切酶活性，用于合成 cDNA 第二链、双链 DNA 3' 末端填补及标记。其他：DNA 聚合酶 Ⅰ、多聚核苷酸激
