COIP
发布于 2018-11-19 · 浏览 2752 · IP 广西广西
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我们这边想做某个杂蛋白ESP与细胞中的蛋白DNMT/TET的相互作用，想知道这个杂蛋白ESP中的哪些成分能与细胞中的蛋白DNMT/TET相互作用，计划用COIP-MS的方法。
目前的做法是，做了杂蛋白ESP的多克隆抗体（兔IgG），买了蛋白DNMT/TET的商品化抗体。将杂蛋白ESP与细胞作用48h后，做coip。洗脱后，用杂蛋白ESP的多克隆抗体做WB验证，发现没有特异性条带，故没有进一步质谱分析。
请问这种情况会是什么问题呢？原代细胞？杂蛋白多抗的问题？蛋白与细胞作用时间太长了？
还是说根本就没有结合？
这种情况有没有什么解决方案，或者应该用什么方法验证一下呢？
以下是两次COIP的结果，没有看到特异性条带
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2752
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