【交流】如何高效，准确的拍摄免疫组化片子？

在形态版学习了不少知识，尽管试验仍存在磕磕碰碰，不顺利，但总算快结束免疫组化试验操作部分。对于图像分析，版主以及hbchendl等做过精彩、原创的分析。但似乎遗漏了如何正确、高效拍摄图片！特别是对于大样本的研究。我仅能说说个人一点小体会：
1、对比鲜明的特异性结果是后期数据分析的基础。
整体实验，无论是免疫荧光、免疫组化等，均要尽可能的标准化、一致性操作，特别是一抗、二抗的孵育时间。对于批量的实验，要求在最短的时间内完成，减少季候改变，特别是温度变化对实验结果的影响。与国外比较，人家现基本是机器自动化染色，咱们大多数是自己干活，人为因素大，因此计时器至少要有。但对于DAB显色，仍是难以要求均一化，难免存在染色过度、有边缘着色的现象。
2、拍片时，先低倍后高倍，确定染色满意的爆光度、对比度。在一个抗体实验中所有切片均按同一条件进行。网上说230爆光好，个人体会难以达到满意，根据实际情况调整是硬道理；对比度，我常选择强对比，原因简单，对比更鲜明。另外，转换每一张切片或者转换高、低倍镜，最好均要调试白平衡。
3、拍摄时，软件中常常附带一些基本功能，比如标尺。拍摄保存时别忘记了。
4、耗时。特别是需要随机统计分析细胞数（至少5-10个视野）。我还没有什么高招！但是多拍几张（不同倍数的片子）总是对的，主要担心后期处理保存的时候，不小心没有了原始的图像，当然也可以备份。但我更喜欢多拍几张。特别是荧光的，前面的师兄一张荧光片子能拍过1小时。
最后，希望版主，hbchendl以及园子里面的高人说说自己的体会，帮助我们提高、进步。谢谢