请教酵母破碎方法

请教各位，有谁了解pichia酵母的破碎方法。我的蛋白是胞内表达的，曾用玻璃珠振荡破碎，振60秒冰浴60秒重复10次，裂解液：EDTA+PMSF+磷酸钠buffer＋甘油,效果不理想。