如何证明是否mRNA反转录cDNA第一链成功
这个帖子发布于 21 年零 280 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
突然想到这个问题，否则从何而知以第一链为摸板扩增时一旦没有产物，是第一链摸板的问题，还是PCR体系的问题：
因为总RNA里的mRNA成分很少，那么反转录出来的就更少了，我用的是promega的盒子。昨天自己想了两个办法，但是都没有实现
1，想用GENE QUANT，根据260，280OD的比值来确定，可是由于cDNA含量很少，所以结果不理想，分光光度计的方法误差比较大，说明不了问题
2，把含有cDNA的mixture跑1%琼脂溏，但是不知道什么原因，跑出来的结果是白板。本来我还以为回出现一些蛛丝马迹，但是却很失望。
另外我想问的是，我跑的白板，可不可能是因为cDNA的含量太少了，所以EB染色看不出来呢？各位的经验是什么？
小弟才从事这个操作，望各位大侠指点
因为总RNA里的mRNA成分很少，那么反转录出来的就更少了，我用的是promega的盒子。昨天自己想了两个办法，但是都没有实现
1，想用GENE QUANT，根据260，280OD的比值来确定，可是由于cDNA含量很少，所以结果不理想，分光光度计的方法误差比较大，说明不了问题
2，把含有cDNA的mixture跑1%琼脂溏，但是不知道什么原因，跑出来的结果是白板。本来我还以为回出现一些蛛丝马迹，但是却很失望。
另外我想问的是，我跑的白板，可不可能是因为cDNA的含量太少了，所以EB染色看不出来呢？各位的经验是什么？
小弟才从事这个操作，望各位大侠指点
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