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紧急求助:非放射性的southern 杂交检测酶切后的基因组

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发布于 2003-12-06 · IP 上海上海
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这个帖子发布于 22 年零 10 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
我用DIG标记的探针做southern杂交,想检测细菌基因组(酶切后)中的待测基因,这个基因约1600KB,不含用于酶切限制性内切酶的酶切位点。

但经过数次实验和改进,上样为该基因的PCR产物的带可以有显色,但上样为酶切产物的带总是没有显色,而且上样量已经加到15ug了,比原则上的灵敏度多了几倍了。

底物显色和化学发光法都做过,但结果均不理想。

偶尔也做出过一两次,但后来又做不出了,折腾了很久。建立起这个后,还有很多样本要做,所以特在这里请教各位,关系到毕业问题,很着急,请给些建议。





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