因为要构建禽腺病毒感染性克隆载体,需要有经验的朋友推荐下好的病毒基因组DNA提取试剂盒。求各位推荐下抽提腺病毒基因组DNA的试剂盒,因为腺病毒基因组有的将近40 kb,比较大,所以需要合适的试剂盒,请各位有经验的朋友能推荐一下。抽提之后用来做感染性克隆的重组载体的。必须要求纯度很好并且不核酸基因技术 · 2016-12-10
各位师兄师姐我做的是腺病毒感染293t和平滑肌细胞,做cont组,GFP组,腺病毒原液组和腺病毒扩增液组,但是3次下来都没有看见荧光(病毒带荧光基因),western blot 也检测不到高表达,病毒原液都加到细胞技术与形态遗传 · 2015-12-12
【求助】MTT试验中使用SPSS求IC50结果与曲线图观察结果不符合在计算腺病毒感染细胞的MTT试验中,求IC50的值根据网上教程使用SPSS计算,但是结果有一些疑惑。如抑制率分别是40.97%和58.84%时的浓度分别是1pfu/cell和2pfu/cell细胞技术与形态遗传 · 2015-03-15
小鼠胰岛打散分离beta细胞病毒感染我在做分离小鼠胰岛然后disperse成细胞,放在事先polylysine处理过的coverslip上,想等它们attach到coverslip上后再加腺病毒感染。问题是细胞老是不attach细胞技术与形态遗传 · 2014-05-16
【求助】请教重组腺病毒PCR鉴定的问题!!!腺病毒感染293细胞后待大部分细胞漂浮起来后收集细胞冻融,冻融上清直接做PCR鉴定没有目的条带,而将冻融上清做滴度测定却可以测得到滴度!!很是郁闷,请问,做PCR时一定要提取病毒DNA吗?直接用冻融核酸基因技术 · 2005-04-14
腺病毒扩增滴度太低买来的商品腺病毒,利用293a扩增;腺病毒感染293后,第二天就变圆漂了,滴度很低;用GFP腺病毒观察看到的荧光很少,漂的时候荧光也不多;扩增用的种子病毒加多加少细胞漂的都很快。不同来源的293细胞核酸基因技术 · 2019-05-18
没有病毒斑?之前用腺病毒感染293T细胞,培养两天有病毒斑出现,做western blot灰度值与对照组比没什么差别,换成平滑肌,都5天了,中间隔了48小时换过一次液,还没有病毒斑出现怎么回事啊?我病毒加了10细胞生物与生物信息 · 2015-12-03
【角膜病讨论】流行性角结膜炎,你那里再闹吗?很不幸,我本人也被腺病毒感染了眼睛!一开始左眼痒,痛,内眦处压痛。结膜充血,红肿,流泪,早晨分泌物多,睁不开眼睛。4~5天了,也没有什么好转。现在卡他症状明显,流泪,痒,耳前淋巴结也压痛了!开始全身社区全科 · 2012-03-20
关于腺病毒的问题我有2个问题,请你耐心看完: 1、重组腺病毒感染瘤细胞,共同孵育后要吸取上清液弃去,洗细胞,为什么?不弃去上清液有影响吗? 2、重组腺病毒表达蛋白的时间,报道不一,与细胞种类、目的基因特性核酸基因技术 · 2004-05-20
综述:儿童腺病毒肺炎诊治的研究进展,不同型别的腺病毒有不同组织嗜性和感染相关的临床表现,常见腺病毒感染后出现的疾病包括呼吸道、胃肠道、眼部和泌尿道等,易在密闭社区暴发流行。而与呼吸道感染相关的腺病毒主要有B亚属(HADV-3、7、11儿科 · 2022-04-26
【求助】腺病毒扩增收毒时间如何判断各位前辈,我现在使用293细胞进行腺病毒扩增 我的腺病毒是带eGFP 的,我用自己扩增的腺病毒感染细胞24小时后,发现绿色荧光很弱,我感觉我扩增病毒是细胞状态还可以,有时36个小时70%细胞变园时收核酸基因技术 · 2011-03-11
我应该使用怎样的实验方案?我包装的腺病毒感染心肌细胞后,在MOI大约是20的时候,感染效率非常低,用western检测不到。我使用的是没有GFP的腺病毒载体,不能通过绿色荧光来观察感染效率,只能使用western检测核酸基因技术 · 2006-12-25
【求助】从其他实验室拿到的cre重组酶腺病毒病毒上清,怎么扩大培养?实验室要做cre重组酶腺病毒感染小鼠肺部诱导肿瘤。cre腺病毒是从外实验室要的,当时就给了1ml病毒上清(第三轮扩大培养的,估计有10*10的量)一直放在-80保存,现在老师让我拿出来扩培。请问细胞技术与形态遗传 · 2013-12-09
重组腺病毒包装后冻融细胞裂解液PCR鉴定怎么做呢?腺病毒感染293细胞后待大部分细胞漂浮起来后收集细胞冻融,冻融上清直接做PCR鉴定没有目的条带,(按操作说明直接PCR鉴定好像没错)而将冻融上清做滴度测定却可以测得到滴度!!很是郁闷,请问,做PCR核酸基因技术 · 2005-04-19
【求助】wb结果条带叠加的问题书提到:: isoform 1 at 18 kDa, isoform 2 at 17 kDa.难道是两种isoform叠加在一起? 我是用重组腺病毒感染细胞,收集细胞后裂解,上样检测的。请各位老师指点蛋白质和糖学 · 2011-09-07
【求助】新c2c12分化问题,边缘有褶皱,核区颜色变深。用腺病毒感染,效率不高。请高手指导。还有,马血清使用前发现浑浊。可以使用吗?可以过滤吗?怎么样判断细胞是污染了。细胞技术与形态遗传 · 2008-05-23
【求助】重组腺病毒载体表达的间接免疫荧光检测?重组腺病毒感染293细胞,做了很多次wb都检测不出来表达,不知道这种病毒载体本身有没有12kd左右的蛋白(我的目的蛋白只有这么大,也是一种病毒蛋白的一段)?所以想试试间接免疫荧光的方法检测。请教免疫学讨论版 · 2005-10-07
腺病毒是否具有毒性,恳请指点!我这次用我自己包装的腺病毒感染心肌细胞,有很大的感染效率。但是使用空载体病毒,相对于不使用病毒组,心肌细胞在形态上也有很大改变,是不是腺病毒本身具有毒性,期望有经验的前辈指导一下,谢谢!我本想使用县细胞技术与形态遗传 · 2006-12-22
【求助】重组腺病毒载体表达的间接免疫荧光检测?重组腺病毒感染293细胞,做了很多次wb都检测不出来表达,不知道这种病毒载体本身有没有12kd左右的蛋白(我的目的蛋白只有这么大,也是一种病毒蛋白的一段)? 所以想试试间接免疫荧光的方法检测蛋白质和糖学 · 2005-10-07
腺病毒是否具有毒性,恳请指点!我这次用我自己包装的腺病毒感染心肌细胞,有很大的感染效率。但是使用空载体病毒,相对于不使用病毒组,心肌细胞在形态上也有很大改变,是不是腺病毒本身具有毒性,期望有经验的前辈指导一下,谢谢!我本想使用县核酸基因技术 · 2006-12-22