请教关于NI柱纯化蛋白的问题
发布于 2004-02-29 · 浏览 1597 · IP 广东广东
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我表达的蛋白是个14KD的小肽，在N端有6个HIS标记
做过WESTERN表明蛋白有标记上
在过柱的时候
上样流出液跟上样液几乎一样，上样buffer用的是10mM的咪挫
用Elute Buffer 洗脱（500mM的咪挫）的时候大部分杂带都有
但是没有我表达的蛋白
有人知道是怎么回事吗？
好像目标蛋白挂不上去，该怎么解决呢？
做过WESTERN表明蛋白有标记上
在过柱的时候
上样流出液跟上样液几乎一样，上样buffer用的是10mM的咪挫
用Elute Buffer 洗脱（500mM的咪挫）的时候大部分杂带都有
但是没有我表达的蛋白
有人知道是怎么回事吗？
好像目标蛋白挂不上去，该怎么解决呢？
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 1597
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