【求助】kinase assay 求助
GST融合表达蛋白的一段序列,做kinase assay,背景很高,无目的蛋白条带。该段序列理论上是有磷酸化位点的,而且也有初期实验证实这一点。所采用的磷酸化激酶是处理后的细胞裂解液,以前的实验证实细胞经处理后通过磷酸化途径磷酸化我们研究的蛋白,我们现在是研究磷酸化的具体位置。哪位高手给点意见?万分感谢!
GST融合表达蛋白的一段序列,做kinase assay,背景很高,无目的蛋白条带。该段序列理论上是有磷酸化位点的,而且也有初期实验证实这一点。所采用的磷酸化激酶是处理后的细胞裂解液,以前的实验证实细胞经处理后通过磷酸化途径磷酸化我们研究的蛋白,我们现在是研究磷酸化的具体位置。哪位高手给点意见?万分感谢!