镍柱纯化求助
发布于 2004-01-12 · 浏览 5206 · IP 北京北京
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表达了一个his-tagged蛋白.由于该蛋白有10个半胱氨酸,所以加入还原剂,用巯基乙醇,但还原剂易氧化,所以每次做之前都补加一点.最近试了几次镍柱都被还原变色,后来一次没怎么变色,但用SDS-PAGE检测的时候,大量蛋白没挂上柱.不知道是不是还原剂的原因.如果是,怎样控制还原剂的量比较好?因为用了一次之后,就不知道lysis液中未被氧化的还原剂还剩多少,请大家帮忙啊.做了一学期还是没有成功.
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 5206
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