【推荐】【胚胎干细胞经验交流】总结初稿
发布于 2003-11-28 · 浏览 3427 · IP 浙江浙江
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推荐干细胞与组织工程讨论版==本周热点话题===胚胎干细胞经验交流
干细胞与组织工程版由于其内容的原因，人气一直有待于提高，经过jmtang与zzy8896的协商，同意在10.12开始本版的“本周热点话题”讨论，以提高各位朋友交流的积极性，经过近一个半月的努力，我们共讨论了六个话题，很多园友积极参与其中，基本达到了本来的目的，下面我就这段时间的讨论做一简单总结：
一、胚胎干细胞经验交流
此讨论由jmtang超版于11.02提出（都晚上10点钟了|)，怪不得当晚没人回），第二天菊花与刀（好早，凌晨00.258D）介绍了一篇有关胚胎干细胞分化中细胞外因子作用的文章，给大家起了一个好头。
接着jmtang主任提出了通过改变培养状态和改变诱导方式从而改变ES分化行为的想法，并提出了一些实验证实。
尔后由我（:)qjzhou2000，这名真怪）根据自己做干细胞的体会，在干细胞分化方面提出了一些建议，同时也提出了几个问题与大家讨论（总算引起了几位斑竹的兴趣！:^)）。由于下面的讨论内容基本上一致，就总起来说了。
1.ES－D3细胞可能已经不太适合做定向分化的实验。
2.建议想做干细胞向单一细胞分化的实验室作一个基因转染干细胞的技术平台。
【要注意启动子具有特异性，否则则失去意义了。报告基因可以有GFP、LACZ、Gal等，考虑到体内实验的重要性，还是以GFP最为合适。zzy8896:)】
3.干细胞的分化不是很难的事情，关键是选好适当的检测方式。【尤其是定向诱导分化。目前研究发现有一些细胞因子可以诱导干细胞向某个方向分化，但目的细胞的比例很低，达不到实际需要，是目前的难点，也是干细胞研究缓慢的原因，可以采用流式细胞仪来检测某细胞的分化比例。zzy8896:)】
4.胚胎干细胞定向分化可以分为谱系分化和直接分化两种，谱系分化可以从发育生物学中临近胚层诱导的方面设计实验，多采用细胞因子诱导的方法，实现胚胎干细胞－祖细胞－分化细胞的分化，这种方法由于原理设计上的限制，得到的分化细胞比例比较少，但作为研究器官组织的发育过程是十分有效的；直接分化可以从临床上相关疾病的治疗药物中选取，多采用一种或少数几种因子诱导的方式，得到的靶细胞比例较多，对于研究细胞移植治疗方面还是很有利的。
几个问题希望大家指教
1.目前干细胞诱导分化的试剂多与肿瘤细胞逆转（有人也称为肿瘤细胞分化）中用的试剂相同，不过用在干细胞的诱导方面可能就是定向诱导了，大家对这个有什么看法，我现在正在着手这方面文献的查找，希望大家指教。
【干细胞、肿瘤细胞、肿瘤干细胞三者之间的关系，是一个很复杂，也很有意义的关系。它们均为幼稚细胞，可以自我增殖，可以自己维持，不断进入下一个细胞周期，在一些化学药物、细胞因子、物理因素的作用下可以诱导分化，变为成熟的或者较为成熟的细胞。确实目前干细胞诱导分化的试剂有的与肿瘤细胞逆转（有人也称为肿瘤细胞分化）中用的试剂相同，比如RA等，对干细胞的分化有一定的诱导作用，但不是很理想，而且其对机体有明显的毒副作用，有致癌变的可能，可以用于体外诱导实验。主要目标还是因该放在细胞因子和相关基因，或者与该药物相关的分子机制上，比如砒霜治疗白血病的研究。干细胞分化机制研究的阐明将对于肿瘤的发生和诱导治疗和诱导缓解，具有非常重要的意义，可能为肿瘤的研究提供一条很好的途径。另zzy8896主任另开了一个帖子，供大家集中讨论 干细胞 肿瘤细胞 肿瘤干细胞的问题:^)】
2.细胞增殖和细胞分化在某种意义上说可以是相对立的两个过程，可不可以这样说：细胞要分化必须离开细胞周期（进入G0期），然后合成分化细胞的部分必须蛋白才能真正分化为靶细胞。如果这样的话,我们可不可以先加一些细胞周期的某种抑制剂，作用一段时间，然后加靶细胞生长必须的一些细胞因子或其他类物质，这样诱导的效率会不会提高？
【zzy8896主任根据自己的实验和相关文献对上面的问题作出了解答：
调节细胞周期，促进干细胞进入G0期，从而退出细胞周期，在其他因子的共同作用下向成熟细胞方向分化。这方面目前已经有一些报道。
不同浓度细胞因子引起不同的信号通路开放，从而产生不同的生物学效应，表现为促进增殖、诱导分化、引起凋亡。这方面有少量报道。
有的细胞因子本身就具有多效性，在不同部位、不同时间、不同浓度有不同的作用。bmp2就是这样一类分子。】
【qjzhou2000 提出血清饥饿、药物诱导、密度依赖三种方法使干细胞脱离细胞周期，并上传一篇血清饥饿可诱导人血管平滑肌细胞再分化的文献以供大家讨论！:)】
先总结这一期吧，问题还是存在的，不知是做干细胞的园友太少，还是其他原因，我们的讨论基本上是在几位主任（就我不是，干完活去找天天评理！），有点孤军奋战的感觉。另外我们的总体方向有点违背jmtang斑竹的原意（从胚胎干细胞讨论到肿瘤细胞上去了，这是我的原因，情大家见谅:8)）。
最后要感谢jmtang、zzy8896、jet2002、菊花与刀和jzy_620等园友的热情讨论和参与，在此表示感谢，同时希望大家继续支持干细胞与组织工程讨论版。
qjzhou2000
干细胞与组织工程版由于其内容的原因，人气一直有待于提高，经过jmtang与zzy8896的协商，同意在10.12开始本版的“本周热点话题”讨论，以提高各位朋友交流的积极性，经过近一个半月的努力，我们共讨论了六个话题，很多园友积极参与其中，基本达到了本来的目的，下面我就这段时间的讨论做一简单总结：
一、胚胎干细胞经验交流
此讨论由jmtang超版于11.02提出（都晚上10点钟了|)，怪不得当晚没人回），第二天菊花与刀（好早，凌晨00.258D）介绍了一篇有关胚胎干细胞分化中细胞外因子作用的文章，给大家起了一个好头。
接着jmtang主任提出了通过改变培养状态和改变诱导方式从而改变ES分化行为的想法，并提出了一些实验证实。
尔后由我（:)qjzhou2000，这名真怪）根据自己做干细胞的体会，在干细胞分化方面提出了一些建议，同时也提出了几个问题与大家讨论（总算引起了几位斑竹的兴趣！:^)）。由于下面的讨论内容基本上一致，就总起来说了。
1.ES－D3细胞可能已经不太适合做定向分化的实验。
2.建议想做干细胞向单一细胞分化的实验室作一个基因转染干细胞的技术平台。
【要注意启动子具有特异性，否则则失去意义了。报告基因可以有GFP、LACZ、Gal等，考虑到体内实验的重要性，还是以GFP最为合适。zzy8896:)】
3.干细胞的分化不是很难的事情，关键是选好适当的检测方式。【尤其是定向诱导分化。目前研究发现有一些细胞因子可以诱导干细胞向某个方向分化，但目的细胞的比例很低，达不到实际需要，是目前的难点，也是干细胞研究缓慢的原因，可以采用流式细胞仪来检测某细胞的分化比例。zzy8896:)】
4.胚胎干细胞定向分化可以分为谱系分化和直接分化两种，谱系分化可以从发育生物学中临近胚层诱导的方面设计实验，多采用细胞因子诱导的方法，实现胚胎干细胞－祖细胞－分化细胞的分化，这种方法由于原理设计上的限制，得到的分化细胞比例比较少，但作为研究器官组织的发育过程是十分有效的；直接分化可以从临床上相关疾病的治疗药物中选取，多采用一种或少数几种因子诱导的方式，得到的靶细胞比例较多，对于研究细胞移植治疗方面还是很有利的。
几个问题希望大家指教
1.目前干细胞诱导分化的试剂多与肿瘤细胞逆转（有人也称为肿瘤细胞分化）中用的试剂相同，不过用在干细胞的诱导方面可能就是定向诱导了，大家对这个有什么看法，我现在正在着手这方面文献的查找，希望大家指教。
【干细胞、肿瘤细胞、肿瘤干细胞三者之间的关系，是一个很复杂，也很有意义的关系。它们均为幼稚细胞，可以自我增殖，可以自己维持，不断进入下一个细胞周期，在一些化学药物、细胞因子、物理因素的作用下可以诱导分化，变为成熟的或者较为成熟的细胞。确实目前干细胞诱导分化的试剂有的与肿瘤细胞逆转（有人也称为肿瘤细胞分化）中用的试剂相同，比如RA等，对干细胞的分化有一定的诱导作用，但不是很理想，而且其对机体有明显的毒副作用，有致癌变的可能，可以用于体外诱导实验。主要目标还是因该放在细胞因子和相关基因，或者与该药物相关的分子机制上，比如砒霜治疗白血病的研究。干细胞分化机制研究的阐明将对于肿瘤的发生和诱导治疗和诱导缓解，具有非常重要的意义，可能为肿瘤的研究提供一条很好的途径。另zzy8896主任另开了一个帖子，供大家集中讨论 干细胞 肿瘤细胞 肿瘤干细胞的问题:^)】
2.细胞增殖和细胞分化在某种意义上说可以是相对立的两个过程，可不可以这样说：细胞要分化必须离开细胞周期（进入G0期），然后合成分化细胞的部分必须蛋白才能真正分化为靶细胞。如果这样的话,我们可不可以先加一些细胞周期的某种抑制剂，作用一段时间，然后加靶细胞生长必须的一些细胞因子或其他类物质，这样诱导的效率会不会提高？
【zzy8896主任根据自己的实验和相关文献对上面的问题作出了解答：
调节细胞周期，促进干细胞进入G0期，从而退出细胞周期，在其他因子的共同作用下向成熟细胞方向分化。这方面目前已经有一些报道。
不同浓度细胞因子引起不同的信号通路开放，从而产生不同的生物学效应，表现为促进增殖、诱导分化、引起凋亡。这方面有少量报道。
有的细胞因子本身就具有多效性，在不同部位、不同时间、不同浓度有不同的作用。bmp2就是这样一类分子。】
【qjzhou2000 提出血清饥饿、药物诱导、密度依赖三种方法使干细胞脱离细胞周期，并上传一篇血清饥饿可诱导人血管平滑肌细胞再分化的文献以供大家讨论！:)】
先总结这一期吧，问题还是存在的，不知是做干细胞的园友太少，还是其他原因，我们的讨论基本上是在几位主任（就我不是，干完活去找天天评理！），有点孤军奋战的感觉。另外我们的总体方向有点违背jmtang斑竹的原意（从胚胎干细胞讨论到肿瘤细胞上去了，这是我的原因，情大家见谅:8)）。
最后要感谢jmtang、zzy8896、jet2002、菊花与刀和jzy_620等园友的热情讨论和参与，在此表示感谢，同时希望大家继续支持干细胞与组织工程讨论版。
qjzhou2000
最后编辑于 2005-06-11 · 浏览 3427
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