启动子|介绍几种启动子的预测工具
启动子是位于基因上游的一段特定DNA序列,能被RNA聚合酶以及多种转录因子识别和结合,从而启动下游基因的转录。启动子决定了基因是否表达、表达的时间、地点及表达量的高低,理解启动子的结构和功能,有助于揭示基因表达调控的分子机制,这对于基础生命科学至关重要。
预测启动子的网站有很多,下面介绍5种常用的:
一、Ensemble
1|打开ensemble【Ensembl genome browser 114】,选择物种并输入要预测的基因名称,然后GO。

2|选择基因点进去。

3|拉到下面就可以看到了。

4|双击上面红框位置,可以定位并放大该区域。

5|可以通过窗口工具查看或选择。
二、The Eukaryotic Promoter Database
1|打开EPDEPD The Eukaryotic Promoter Database,输入物种名和基因名。

2|这个网站包含很多组蛋白的测序分析以及启动子结合峰分析,往下拉。

3|按这样子修改预测参数:motif类型可以根据需求更改。

4|出来的这个便是预测的启动子位点。

三、Promoter 2.0
1|打开Promoter 2.0 - DTU Health Tech - Bioinformatic Services直接粘贴序列或者导入文件。

2|点submit结果就出来了。

四、Softberry
这是个在线工具库,在这个库里预测人启动子的工具有三个,由于算法不同,得到的结果也有差异。(当然这个库的使用可能要接VPN)Search for promoters and functional motifsFGENESH 这里拿TSSG进行演示:

1|点进去后直接粘贴或者选择下载好的文件,点process即可

2|结果如下

预测都是依据一些固有的研究进行计算预测,当然由于算法不同,预测到的位点可能不尽相同。

有一篇文献分析统计过这几种预测工具的准确性,TSSG是最高的。
预测是不完全准确的,需要得到准确位点可以通过以下实验进行检测:
- 荧光素酶/报告基因实验版主帖| 荧光素酶报告载体构建及实验流程篇
- 5' RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)
- ChIP-PCR/ChIP-seq(染色质免疫沉淀)
- EMSA(电泳迁移率分析)EMSA|Electrophoretic Mobility Shift Assay-DNA&Protein 互作证明实验