口腔支原体ATCC 23714为什么那么难养

养过支原体的都知道，其实支原体入门难，熟练容易，精通难。说白了，培养基不出错，操作严格按照sop不去偷懒私自自我创造就都可以养出来。

回到问题，口腔支原体属于比肺炎难养一些的支原体，原因主要在口腔支原体本身的特点：1.对营养的强要求性；2.本身支原体需要落脚点

详解：

一. 营养的强要求

1. 血清是否使用了劣质血清，国产血清或者新生牛血清，血清对支原体生长有很明确的作用，在肺炎支原体的培养中，在使用了澳洲新生牛血清对比澳洲胎牛的情况下，会出现至少CFU 30%的差距，而口腔的情况则会出现生长衰弱甚至长期不生长。如果想要弥补血清的差距可以通过添加几种生长因子进行一定程度的补救。

2. 干粉的配方不科学或者原材料使用便宜国产货。23714在营养需求方面存在更苛刻，对优质动物蛋白、脂类等存在大量需求，如果配方使用大量植物性蛋白一定会对支原体生长有影响（请参考支原体发生的原生环境——让吃肉的去吃豆子，身体好的还可以凑合，身体差的直接最后一代）。国产培养基在细菌领域的差距较小主要在大部分细菌更皮实且大部分常规CP细菌为常见环境中就有的，因此，国产使用廉价原料影响微乎其微，但是支原体的情况就会出现某些差距，而这些差距就会在口腔、猪鼻以及滑液支原体中直接以不生长的形式体现。

国产培养基由于含有氨基酸成分在，因此后期会因为氨基酸降解而出现液体培养基变红的情况，而且部分氨基酸的在热状态下极不稳定，因此会出现在短期就降解的速度远大于口腔吸收的速度，结果就是口腔在液体培养基中还没怎么生长，结果氨基酸就差不多分解完，并且液体也变红了，那么在接下来传代的过程中的10ml提取1ml接种新培养基就会变成变相稀释（如果新液体培养基与老培养基同期配置也有氨基酸选择不当的情况，那么新培养基的氨基酸含量也岌岌可危），因此请不要因为以往培养细菌可以使用廉价培养基，也认为同是微生物的支原体也可以廉价培养基凑合。

二. 本身生长需要落脚点

大部分支原体适合摇瓶增菌（效果比静止更好），但口腔更适合有落脚点的地方培养，所以，口腔在刚接种液体培养基的时候请抑制住躁动的心，不要动手拿进拿出，想要观察可以通过放置阴性对照的颜色对比。