求助，建立间接Elisa检测方法
发布于 04-02 · 浏览 311 · IP 北京北京
打算建立一种间接Elisa的检测方法，区分野毒感染和疫苗免疫，包被的抗原是肽段。目前使用棋盘法进行了包被浓度和二抗稀释度的摸索，但是结果发现阴性血清OD值偏高，甚至高于野毒血清，理想状况下OD值应该是，野毒>疫苗>阴性，想问问大家为什么会出现这种情况后续需要哪些改进措施？
几个关键反应条件如下
包被：4℃过夜包被
封闭：3%BSA，2h
洗涤：2min，3次
一抗：1:100稀释，37℃1h
洗涤：3min，3次
二抗：梯度稀释，37℃1h
洗涤：5min，3次
显色：15min
最后编辑于 04-02 · 浏览 311
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