WJO HNS | 骨髓间充质干细胞联合HGF防治兔亚急性声带损伤 | 论著

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原文2024年9月16日在线发表与《世界耳鼻咽喉头颈外科杂志》（英文）

原文作者：中国人民解放军海军特色医学中心耳鼻咽喉科（徐恩鸿）；上海交通大学附属瑞金医院耳鼻咽喉头颈外科（孟昕君）；海军军医大学第二附属医院（上海长征医院）耳鼻咽喉头颈外科（王天宇，武舜钰，刘环海）；上海交通大学附属瑞金医院耳鼻咽喉头颈外科（郎军添）

【摘要】

目的 声带瘢痕常导致严重语音障碍及气道狭窄，而亚急性期（7-30天）的干预研究较少。本研究旨在探讨骨髓间充质干细胞（BMMSCs）联合肝细胞生长因子（HGF）在兔声带损伤模型亚急性期的应用，观测对细胞外基质（ECM）再生及胶原重塑的作用。

方法 通过显微钳在18只新西兰白兔双侧声带制造损伤模型，并于伤后2周或4周注射不同复合物：BMMSCs-脱细胞真皮基质（ADM）复合体（Complex组）、BMMSCs-ADM+HGF（Complex+HGF组）及磷酸盐缓冲液（PBS对照组）。术后60天处死动物，通过免疫组化（IHC）分析Ⅰ型胶原（Col-I）和Ⅲ型胶原（Col-III）表达，透射电子显微镜（TEM）观察胶原超微结构，流式细胞检测复合物释放的细胞因子（bFGF、HGF和DCN）水平，并评估声带黏膜形态学恢复。

图1 声带损伤模型的建立与MSC复合物修复后形态,其中e即为声带黏连喉狭窄

a 为正常兔声带；b为电子喉镜辅助下对声带机械损伤造模；c为损伤模型范围；d为声带粘膜不光滑，声门闭合不全；e为声带前联合黏连，声门狭窄；f为电子喉镜辅助下注射修复声带损伤；g.为对照组瘢痕恢复情况，仍可见不规则声带粘膜；h/i.分别为复合物和复合物联合HGF修复声带，声带边缘未见明显瘢痕

结果：IHC分析显示，损伤2周后注射的Complex+HGF组，Col-I光密度值（0.115±0.002）显著低于Complex组（0.122±0.002）和对照组（0.132±0.003）（p<0.05），且Col-III分布更规则。

TEM观察：Complex+HGF组的胶原纤维直径（65.59±7.88 nm）较对照组（72.75±13.20 nm）更均匀（p<0.05），胶原结构评分（1.58分）显著优于对照组（2.55分）。

图2 BM-MSCs分泌功能检测

A：bFGF/HGF/DCN三种细胞因子的OD值与浓度的二项回归曲线；B：3种细胞因子的OD值柱状图，显示bFGF，HGF与DCN在共培养体系内明显增多（p＜0.05）

图3 修复前后声带固有层IHC结果及分析（×200）

I. 为Col-I、Col-III抗原表达情况；II为不同组别Col-I、Col-III抗原染色的OD值（450nm），及Col-I在不同组别浅深固有层OD值比。III为固有层中α-SMA阳性的肌源纤维细胞表达情况。A：对照组，B:2周CH组，C：2周C组， D 为4周CH组，N为未损伤正常组

细胞因子检测：BMMSC+ADM共培养的培养基中细胞因子的OD值为：bFGF（0.4295±0.0137）、HGF（0.4193±0.0067）及DCN（0.4525±0.0283），均高于对照组（p＜0.05）

形态学评估：伤2周后干预的Complex+HGF组声带黏膜平滑度评分显著优于对照组例）（p=0.010）。

表 声带黏膜形态评分

结论：BMMSCs联合HGF可显著降低Ⅰ型胶原沉积、改善胶原排列，增强干细胞的旁分泌发挥抗纤维化作用，促进亚急性声带损伤的良性修复。本研究为亚急性期声带瘢痕的再生治疗提供了新策略，但需进一步验证其临床应用潜力。

引用本文：

Xu E-H, Meng X-J, Wang T-Y, Wu S-Y, Liu H-H, Lang J-T. Novel application of bone marrow mesenchymal stem cells combined with hepatocyte growth factor on subacute vocal fold wound healing. World J Otorhinolaryngol Head Neck Surg. 2024; 1-12. doi:10.1002/wjo2.215

作者介绍

[第一作者］

徐恩鸿

海军特色医学中心耳鼻咽喉科 主治医师

[通讯作者］

郎军添

医学博士，主任医师，硕士研究生导师

上海交通大学附属瑞金医院耳鼻咽喉头颈外科（北院）执行主任

《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》编委

关于WJO-HNS

《世界耳鼻咽喉头颈外科杂志（英文）》（World Journal of Otorhinolaryngology-Head and Neck Surgery,WJO-HNS）创刊于2015年，ISSN2095-8811,CN10-1248/R，是由中国科学技术协会主管，中华医学会主办，Wiley全球发行的OA期刊。期刊面向国内外征稿，并实行同行评议。

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