实验常见细菌有哪些?为什么常用滤器0.22μm,你懂多少?

细胞培养怎么细菌污染啦?PCR扩增怎么会有非特异性条带?--您在培培养基的或者试剂的时候,有过滤吗?常用多大的滤器-直径过滤的?

(图1 细胞培养过程中严重的细菌污染)
今天小编就给大家实验室最常见的滤器-0.22μm到底能过滤哪些细菌呢?它有哪些用途呢
滤器的直径应该怎么计算呢[1]?

d = 毛细管直径(孔径)
k = 形状校正因子,修正通过膜孔和直接通过毛细管的偏差
σ = 润湿过滤器液体的表面张力
P = 克服表面张力作用,取代膜孔中的水所需的压力
θ = 液体与毛细管壁(滤膜)的接触角
(备注:为什么不是0.225μm? ....实际上小数点后第二位已经没有意义了,之后的电镜观察实际平均孔径并非0.22或0.2μm)
实验室常见细菌[2]

(图2 常见细菌分类 [3])
细菌(Bacteria)需要借助显微镜放大数百至上千倍才能看到的微生物。它们的大小通常以微米(即:μm;1μm=1/1000mm)作为测量单位。
球菌:直径约1μm;
中等大小的杆菌:长2~3μm,宽0.3~0.5μm;
(值得注意的是:菌龄与环境等因素对菌体大小有影响)
1 球菌(Coccus)
球菌表现出来的形式以球形或近似球形(如肾形、矛头形或豆形),直径约1 μm,在标本和培养物中细菌可呈单个分散存在。据细菌分裂的平面不同以及菌体分离程度的差异,根据细菌细胞的排列方式的不同,又分为:
(1)双球菌(Diplococci):两个菌体成双排列,如脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌、淋病奈瑟菌。
(2)链球菌(Streptococci):许多菌体粘连成链状,如溶血性链球菌。
(3)葡萄球菌(Staphylococci):许多菌体无规律地堆积似一串葡萄,如金黄色葡萄球菌医学教。育网搜集整理。
(4)四联球菌(Tetrad)和八叠球菌(Sarcina):4个菌体排列成正方形,称为四联球菌。8个菌体粘附成包裹状,称为八叠球菌。
2 杆菌(Bacillus)
杆菌通过显微镜观察,呈现呈杆状或球杆状。杆菌是在细菌中最多的一类,他们的大小、长短、粗细存在较大的差异。
较大杆菌:炭疽芽胞杆菌长3~10μm;
中等大小杆菌:中等的如大肠埃希菌长2~3μm;
较小的杆菌:小的如布鲁菌长仅0.6~1.5μm;
(自然界中多数杆菌存在形式多样,可排列成链状,如炭疽芽胞杆菌;呈分支状,如结核分枝杆菌;呈“八”字或栅栏状,如白喉棒状杆菌。)
3 螺形菌(Spirillum)
在显微镜下呈现螺形菌菌体弯曲呈螺形,可分弧菌和螺型菌类:
弧菌(Vibrios):菌体长2~3μm,只有一个弯曲,呈弧状或逗点状,如霍乱弧菌。弯曲菌除弯曲呈弧形外,尚可见弯曲呈S形或海鸥状,菌长与弧菌相似。
螺菌(Vibrios)和螺旋体(Spirochaetes):菌体长3~6μm,有数个弯曲,如鼠咬热螺菌。
4 常见菌粒径
在实验室或者谈论过程中,我们经常听见或说的细菌:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和铜绿假单胞菌。
表1 常见菌长度或直径


总结,0.22μm滤器在配制试剂过程中经常被使用,但也不是全能的。例如,病毒(0.02~0.3μm),因此,我们就需要特殊的办法清除。此外,在收集病毒的时候,也不能够使用0.22μm滤器,这会损伤病毒。支原体(0.1~0.3μm),直径小于0.22μm,那么在面对细胞的支原体污染时候,不珍贵的情况,尽快丢弃且将培养环境彻底消毒;珍贵的情况下使用支原体抑制剂持续处理。
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参考
[1] https://zhuanlan.zhihu.com/p/653310561
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